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    流式檢測服務

    產品簡介:流式檢測服務:免疫表型分型、表面抗原鑒定、DNA含量檢測、細胞核型分析、細胞周期檢測、細胞凋亡檢測、細胞分選 等。

    產品型號:

    更新時間:2021-11-01

    廠商性質:生產廠家

    訪 問 量 :1496

    服務熱線

    021-51216810

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    細胞流式檢測服務(FACS)


    細胞流式檢測是一種在液體系統中,快速測定單個細胞或細胞器的生物、物理和化學特性,并根據這些特性將所需要的細胞或細胞器進行定量分析和分選的技術。它是一種可以快速、準確的檢測細胞或者生物學顆粒的多種特性的技術,用來了解細胞群的均值和分布情況,并還可以分選感興趣的細胞、對該細胞做進一步的培養研究。

    流式檢測服務項目:免疫表型分型、表面抗原鑒定、DNA含量檢測/細胞核型分析、細胞周期檢測、細胞凋亡檢測、細胞分選、細胞內鈣離子檢測、線粒體膜電位檢測等。


    服務項目

    樣品要求

    應用試劑

    實驗周期

    免疫表型分型

    培養的細胞:如白血病細胞,客戶刺激好的細胞、抗凝血、脾勻漿等。

    破膜劑,固定劑,刺激劑、特異性抗體(客戶提供或我司代購)

    1~2周

    表面抗原鑒定

    新鮮培養的細胞

    特異性抗體(客戶提供或我司代購)

    1~2周

    細胞周期檢測

    新鮮細胞或70%酒精固定細胞,細胞數量不低于1*10^6個/樣品,細胞生長良好,無污染,附細胞生長照片。

    RNase A、PI染料

    1~2周

    細胞凋亡檢測

    新鮮細胞,細胞數量不低于3*10^6個/樣品,細胞生長良好,無污染,附細胞生長照片。

    AnnexinV-FITC細胞凋亡檢測試劑盒

    1~2周

    細胞分選

    根據客戶樣品類型和方案,詳詢業務員!


    1~2周

    細胞內鈣離子檢測

    新鮮培養的細胞

    Fluo-3 AM 鈣離子熒光探針

    1~2周

    線粒體膜電位檢測

    新鮮培養的細胞(懸浮培養/爬片培養)

    JC-1 線粒體膜電位熒光探針

    1~2周



    流式.jpg


    細胞凋亡(apoptosis)是細胞的一種基本生物學現象,在多細胞生物去除不需要的或異常的細胞中起著必要的作用。它在生物體的進化、內環境的穩定以及多個系統的發育中起著重要的作用。細胞凋亡不僅是一種特殊的細胞死亡類型,而且具有重要的生物學意義及復雜的分子生物學機制。凋亡是多基因嚴格控制的過程,這些基因在種屬之間非常保守,如Bcl-2家族、caspase家族、癌基因如C-myc、抑癌基因P53等。而凋亡過程的紊亂可能與許多疾病的發生有直接或間接的關系。如腫瘤、自身免疫性疾病等,能夠誘發細胞凋亡的因素很多,如射線、藥物等。細胞發生凋亡時,不同區域內(如細胞膜、細胞漿、線粒體、細胞核等)會發生不同的生理生化改變。因此,針對不同區域的細胞凋亡檢測要采用不同的方法。

    凋亡檢測方法.png

    1)Annexin V 凋亡檢測

    原理:Annexin Ⅴ是一種分子量為35-36kD的Ca依賴性磷脂結合蛋白,正常細胞中,磷脂酰絲氨酸(phosphatidylserine, PS)只分布在細胞膜脂質雙層的內側,細胞發生凋亡早期,膜磷脂酰絲氨酸(PS)由脂膜內側翻向外側。Annexin V作為一種磷脂結合蛋白,與PS有高度親和力,它通過細胞外側暴露的磷脂酰絲氨酸與凋亡早期細胞的胞膜結合。因此Annexin V是檢測細胞早期凋亡的靈敏指標。該方法通常結合流式細胞術一起使用。

    2)線粒體膜電位分析(JC-1)

    JC-1是一種廣泛用于檢測線粒體膜電位的理想熒光探針??梢詸z測細胞、組織或純化的線粒體膜電位,線粒體膜電位的下降是細胞凋亡早期的一個標志性事件。

    原理:在線粒體膜電位較高時,JC-1聚集在線粒體的基質(matrix)中,形成聚合物(J-aggregates),可以產生紅色熒光(Ex/Em = 585/590);在線粒體膜電位較低時,JC-1不能聚集在線粒體的基質中,此時JC-1為單體(monomer),可以產生綠色熒光(Ex/Em = 510/527 nm)。這樣就可以非常方便地通過熒光顏色的轉變來檢測線粒體膜電位的變化。

    3)Caspase活性檢測

    Caspase半胱氨酸蛋白酶家族引發的級聯反應是細胞凋亡過程的中心環節,其激活主要包括線粒體依賴途徑和死亡受體介導的信號轉導途徑。

    原理:激活后的下游 Caspase,通過切割特異性底物,導致細胞凋亡。Caspase的活化是導致細胞凋亡的中心環節,細胞凋亡功能的抑制將導致腫瘤的發生及免疫功能的異常,而細胞凋亡功能亢進與組織損傷和器官功能衰竭的發病密切相關。

    4)TUNEL凋亡檢測

    細胞凋亡中, 染色體DNA雙鏈斷裂或單鏈斷裂而產生大量的粘性3'-OH末端,可在脫氧核糖核苷酸末端轉移酶(TdT)的作用下,將脫氧尿苷三磷酸核苷酸(dUTP)和熒光素形成的衍生物標記到DNA的3'-末端,從而可進行凋亡細胞的檢測,稱為TUNEL法。由于正常的或正在增殖的細胞幾乎沒有DNA的斷裂,因而沒有3'-OH形成,很少能夠被染色。由此,TUNEL是檢測DNA 片段化(細胞凋亡)的常用方法。

    細胞凋亡是生命的基本現象,是維持體內細胞數量動態平衡的基本措施。在胚胎發育階段通過細胞凋亡清除多余的和已完成使命的細胞,保證了胚胎的正常發育;在成年階段通過細胞凋亡清除衰老和病變的細胞,保證了機體的健康。和細胞增殖一樣細胞凋亡也是受基因調控的精確過程。


    細胞功能研究相關檢測:

    2D細胞培養和觀察

    3D細胞培養和觀察

    原代細胞分離/培養/鑒定

    細胞增殖/毒性檢測(MTT 法/CCK8 法)

    細胞凋亡檢測(AnnexinV FITC/PI雙染流式法/Tunel法)

    細胞周期檢測(PI染料標記流式法)

    細胞遷移/侵襲檢測(劃痕法/Transwell法)

    流式細胞分選(流式細胞術)

    細胞免疫熒光檢測

    小管形成實驗(tube formation,體外血管生成實驗)

    細胞克隆形成實驗

    細胞外泌體分離與鑒定

    慢病毒包裝及穩轉株篩選

    電生理檢測

    個性化細胞實驗(藥物篩選等)

    細胞模型已經于人類疾病研究和治療藥物的篩選領域中得到廣泛應用。我司可根據客戶的具體方案提供多種細胞模型的構建及相應的細胞生物學功能檢測。


    上海昆盟生物科技有限公司 (Coweldgen Scientific Co.,LTD) 是一家專注于生命科學領域提供相關試劑產品和服務的生物高科技企業,坐落于上海聚科生物產業園。公司提供種類齊全的細胞系和多種原代細胞、質量穩定的細胞培養試劑產品、成熟高效的技術服務。本著“守正創新,科學嚴謹"的理念,我們以高標準塑造行業品牌,以全新視野構建現代企業,勇于探索和創新。公司業務范圍涉及全國各省市自治區,與國內多家醫院、高校、科研院所、生物科技公司建立了良好的合作關系,贏得了良好的市場聲譽和廣泛的認可,我們保證將繼續為廣大科研用戶提供專業、高效、優質的產品及服務!

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